4分鐘前 ISH服務(wù)為先「貝科新肽」[貝科新肽a5f8c59]內(nèi)容：RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是：在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下，用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段，按核酸雜交中堿基配對原則，與待測細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交)，所形成的雜交體(Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn)，其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，已成為有效的分子病理學(xué)技術(shù)，同時(shí)在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。

預(yù)雜交

1）每個(gè)管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。

2）用等體積的HYB＋取代HYB－。

3）60℃水浴，預(yù)雜交4小時(shí)以上。

雜交

1）吸去預(yù)雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..

2）60℃ 溫浴過夜。

注：雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結(jié)合越好，溫度越高，背景越小。

原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用：

生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)：在生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如，通過標(biāo)記特定基因的探針，可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化，進(jìn)而研究其對環(huán)境的影響和作用。

進(jìn)化生物學(xué)：在進(jìn)化生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究物種之間的遺傳差異和進(jìn)化關(guān)系。例如，通過比較不同物種之間基因序列的差異，可以揭示物種之間的親緣關(guān)系和進(jìn)化歷程。

植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括：

檢測物種或品種特異性：通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異，從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。

遺傳育種：通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測到不同品種之間基因表達(dá)的差異，從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如，通過將特定的外源基因?qū)氲街参锛?xì)胞中，然后利用原位雜交技術(shù)檢測該基因在植物細(xì)胞中的位置和表達(dá)情況，為遺傳育種提供重要的參考信息。